Применение электрохимических и йодсодержащих препаратов для лечения и профилактики инфекционных болезней кроликов



Скачать 334,51 Kb.
Дата29.06.2015
Размер334,51 Kb.


Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«БЕЛГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ

СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ В.Я. ГОРИНА»

УДК 619:614.9:546.15:636.92

Инв. номер


УТВЕРЖДАЮ

Ректор ФГБОУ ВПО

БелГСХА им. В.Я Горина
__________А.В. Турьянский


ОТЧЕТ

О НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЕ
по теме:

применение электрохимических и йодсодержащих препаратов для лечения и профилактики инфекционных болезней кроликов

Начальник научной части _________А.Н. Ивченко


Руководитель темы _________ А. М. Коваленко

БЕЛГОРОД 2013


Реферат
Отчет 30с, 6 табл., 2 рис., 10 источников.
ЖИВОТНЫЕ, КРОЛИКИ, ЙОДСОДЕРЖАЩИЙ ПРЕПАРАТ-ЙОДПРОТЕКТИН, ЭЛЕКТРОХИМИЧЕСКИЕ РАСТВОРЫ, ЛЕЧЕНИЕ, ПРОФИЛАКТИКА, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ

Объектом исследования являются кролики разных пород, инфицированные возбудителями бактериальных инфекций.

Цель исследований – изучение распространенности инфекционных болезней кроликов, сопровождающегося развитием: Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli-, – инфекций и разработка способов применения электрохимических и йодсодержащих препаратов для лечения и профилактики инфекционных болезней кроликов. Для достижения цели были решены следующие задачи: изучена распространененность Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli- – инфекций, вызывающих инфекционные болезни у кроликов; определена чувствительность выделенных возбудителей (Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli к традиционным антибиотическим веществам ( антибиотикам), йодсодержащим и антибактериальным препаратам, обладающих антисептическими, антибактериальными и ранозаживляющими свойствами; разработаны методические подходы и рекомендации. проведены испытания по профилактике и лечению Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli-, – инфекций, вызывающих инфекционные болезни у кроликов, с использованием йодсодержащих и электрохимических растворов, обладающих антисептическими, антибактериальми и ранозаживляющими свойствами.


Содержание







Нормативные ссылки

4

Введение

5

1. Обоснование направления исследований

8

2. Методика проведения исследований

13

3. Результаты исследований

15

Заключение

28

Список использованных источников

29


Нормативные ссылки
В настоящем отчете о научно-исследовательской работе использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 2874 "Вода  питьевая";

ГОСТ 13830-84 Соль поваренная пищевая;

ГОСТ 20010-93 Резиновые перчатки;

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная;

ГОСТ 4233-77 Хлорид натрия марок "ХЧ" или "Ч";

ГОСТ Р 51232-98 Вода очищенная для гемодиализа;

ГОСТ Р 51760-2001 Полимерные бутылки, канистры;

ГОСТ Р 51232-98. Вода питьевая водопроводная;

ГОСТ Р 12.4.013-97.12.4.7 Защитные очки;

ГОСТ Р 8.579-2001 Номинальные объёмы расфасованного средства;

ГОСТ 12.1.007-76. Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности.

ГОСТ 12.4.021-75 Приточно-вытяжная вентиляция;

ГОСТ 12.4.121-83 Промышленные фильтрующие противогазы марок А и БКФ;

ГОСТ 12.4.131-83, ГОСТ 12.4.132-83 хлопчатобумажные халаты;

ТУ 18-11-65 Техническая поваренная соль;

СанПиН 2.1.4.559 – 96 Вода питьевая водопроводная;

Введение

Наиболее ощутимый ущерб в кролеководческих хозяйствах наносят бактериальные и вирусные инфекционные болезни, которые сопровождается сенсибилизацией возбудителей секундарных инфекций: Staphylococcus aureus, Staphylococcus albus, Staph. еpidermidis, E.coli. Данная инфекционная патология встречается у 15-50% кроликов, практически во всех кролеководческих хозяйствах России. Длительное время ученые ветеринары проводили изыскательские работы по снижению риска развития инфекционных болезней кроликов, а так же по использованию антисептических, антибактериальных и ранозаживляющих препаратов, не содержащих антибиотики. Наиболее часто встречающимися болезнями кроликов являются: стафилококкоз, колибактериоз, инфекционный стоматит, инфекционный ринит. миксоматоз, вирусная геморрагическая болезнь и др.

Инфекционному стоматиту («мокрая мордочка») подвержены в основном молодняк с под­сосного (20—26 дней) и до 3-месячного возраста, независимо от породы и пола; полновозрастные кролики болеют редко. Возбудителем инфекционного стоматита является фильтрующийся вирус. При заболевании у крольчат воспаляется слизистая оболочка ротовой полости, наблюдается обильное слюнотечение, на языке появляются язвочки или сыпь. Нередко болезнь сопровождается поносом. Болезнь быстро распространяется на кролиководческой ферме, особенно в антисанитарных условиях, поражая сначала отдельные гнезда (семьи), а затем весь молодняк. Источник заражения — больные инфекционным стоматитом кролики. При сильных эпизоотиях смертность молодняка колеблется от 30 до 50%. Латентный (скрытый, инкубационный) период длится от двух до восьми дней. Инфекционный ринит (заразный насморк) поражает прежде всего слизистые оболочки носовых ходов. Источник инфекции — больные кролики. Возбудители заболевания — вирус, стафилококки, бронхосептикум. Распространению инфекции способствует совместное содержание больных животных со здоровыми. Если не принять своевременных мер, то более половины всех кроликов в хозяйстве могут в скором  времени оказаться больными. При неблагоприятном течении болезнь может распространиться в глубь дыхательных путей, вызвать воспаление бронхов, легких и привести к падежу кроликов. Возникновению заболевания спо­собствуют простуда, вызванная сквозняками, намоканием крольчат, а также раздражающие факторы — повышенная концентрация в воздухе помещения аммиака, дыма и пыли. К инфекционному риниту восприимчивы кролики всех возрастов, особенно при пониженной резистентности их организма.

В начале заболевания наблюдаются покраснение и набухание слизистой оболочки носовой полости и обильное выделение прозрачной жидкости. Затем слизистая мутнеет, становится серовато-желтой и покрывается обильным экссудатом. Больные кролики чихают, из носа выделяется слизисто-гнойный или гнойный экссудат. Кролик при этом трет нос передними лапами, на которых образуются своеобразные зачесы. Перезаражение кроликов происходит аэрогенным путем при чихании. При осложненной форме инфекционного ринита дыхание у кролика затруднено, общее его состояние угнетенное, при прослушивании в легких слышны хрипы. Температура у больных животных повышается, они отказываются от корма.

Распространены стафилококкозов способствуют антисанитарные условия содержания, скученность кроликов и драки между ними, травмы от острых предметов, покусы крольчатами сосков у самок и т. д. Проявляется стафилококкоз в форме септикопиемии, блуждающей пиемии, пододерматита, общей септицемии и мастита. На коже крольчат, больных септи копиемией, образуется множество гнойничков величи­ной с просяное зерно. Такие крольчата обычно погибают. Блуждающая пиемия характеризуется появлением на различных участках тела и даже на внутренних органах гнойных абсцессов.

Причиной мастита (воспаления молочной железы) могут явиться покусы крольчатами сосков (особенно у маломолочных крольчих.) Молочная .железа у крольчихи в таком случае воспаляется, становится твердой и бывает покрыта язвами. Крольчиха перестает кормить крольчат молоком. При надавливании на молочную железу из сосков выделяется молоко с примесью гноя. Маститных крольчих немедленно уничтожают. При общей септицемии гнойные абсцессы могут возникать в различных органах или мышцах. По мере созревания они вскрываются в брюшную или грудную полость, в результате чего кролик сразу погибает.

При пододерматите вначале выпадает волос на нижней поверхности лап, затем образуются сухие корочки, переходящие в дальнейшем в жесткие мозоли (намины), которые далее трескаются. При попадании в раны и трещины инфекции развиваются гнойные процессы. Кролики от этого беспокоятся, теряют аппетит и худеют. Такие животные подлежат выбраковке.

Колибактериоз характеризуется угнетенным состоянием кроликов и расстройством функции желудочно-кишечного тракта. Возбудитель — кишечная палочка. Болезнь может поразить значительную часть поголовья кроликов на ферме. Возникновению болезни способствуют антисанитарные условия содержания животных, плохое кормление и снижение общей резистентности. Больные кролики теряют аппетит, страдают  поносом, быстро худеют и через 2—8 дней погибают.

Традиционно для лечения и профилактики инфекционных болезней кроликов используют настойку йода (5 мл на 10 л воды) или кристаллический марганцовокислый калий (до появления слабо-розового окрашивания) для профилактики инфекционного стоматита, 33%-ного водного раствора экмо-новоциллина, 1 %-ного раствора фурациллина (по 7—8 капель в каждую ноздрю) или раствора, содержащего в 1 мл 15 000—20 000 ЕД пенициллина (по 10—12) капель введение в носовую полость 2 раза в день в течение четырех-пяти дней для профилактики инфекционного ринита, пенициллин или стрептомицин в дозе 20000—25 000 ЕД, а также бициллин в дозе 30 000—50 000 ЕД в расчете на 1 кг живой массы кролика внутримышечно для лечения стафилококкоза, биомицин вместе с кормом в дозе 25 мг и синтомицин в дозе 0,1 г на 1 кг живой массы для лечения колибактериоза.

Последние 10-15 лет существует тенденция снижения применения препаратов содержащих антибиотики. Были разработаны препараты, не содержащие в своем составе антибиотики. Научной группой БелГСХА с 2012 года проводятся изыскательные работы по разработке и применению йодсодержащих препаратов обладающих антисептическими, антимикробными и ранозаживляющими свойствами.



1. Обоснование направления исследований

Йод обладает широким спектром антимикробного, антигельминтного, фунгицидного, антивирусного и противопротозойного действия. Доказано, что йодистые соединения блокируют дыхательные ферменты бактерий, проявляет тем самым бактерицидные и бактериостатические свойства. У микроорганизмов к йодистым препаратам, в отличии от антибактериальных, не возникает резистентность даже при длительном применении [2,3].

Препараты йода используют как антисептические, кровоостанавливающие, раздражающие. отвлекающие, противовоспалительные и ранозаживляющие средства. Местное действие этих лекарств может проявляться в улучшении трофики тканей и рассасывании токсических веществ из очага воспаления. Йодистые препараты показаны в гинекологии при воспалительных процессах половой сферы, кожных болезнях, желудочно-кишечной патологии различной этиологии и в хирургической практике. Их применяют и в качестве дезинфектантов для обеззараживания помещений и оборудования.

Препараты йода очень легко всасываются слизистыми оболочками желудочно-кишечного тракта животного, причем йодистые соли могут всасываться в неизмененном виде, а молекулярный йод отчасти переходит в йодистые соли или вступает в сложные соединения с жироподобными веществами (липоидами) и временно циркулирует в организме в форме органических соединений.Резорбтивное действие йода при выделении его через легкие проявляется в виде отхаркивающего и муколитического эффекта.

Длительный опыт применения различных препаратов йода показал, что те из них, которые обладают выраженными антимикробными свойствами с широким спектром действия (спиртовой раствор йода и йод однохлористый) являются вместе с тем резко токсичными при введении в организм животных и человека, что значительно суживает область их клинического применения. И наоборот, те йодистые препараты, которые являются нетоксичными при введении в организм (например, йодистый калий), совершенно лишены антимикробных свойств и поэтому применение их для лечения и профилактики микробных заболеваний лишено смысла [1].

Теоретически обоснована и разработана система ветеринарно - санитарных мероприятий по профилактики и лечению инфекционных заболеваний с использованием (йодофоров) йод-неонол. Существует лекарственное средств монклавит, Монклавит-1 - лекарственное антисептическое и дезинфицирующее средство широкого спектра действия, представляющее собой водно-полимерную систему на основе йода в форме комплекса поли-N-виниламидациклосульфойодида. Монклавит-1 как лекарственное средство предназначен для:



  • эффективного лечения и профилактики инфекционных заболеваний животных, он обладает антибактериальными, фунгицидными, противовоспалительными и регенерирующими свойствами;

  • профилактики и лечения йод-дефицитных заболеваний животных, повышения неспецифического иммунитета, стимуляции роста

  • санации воздушной среды в присутствии животных;

Применение Монклавита-1 позволяет снизить затраты и повысить эффективность производства, в том числе уменьшить количество применяемых антибиотиков; понизить токсичность кормов; увеличить сохранность, прирост массы тела животных и вывод молодняка птицы; увеличить выпуск готовой продукции. Применение Монклавита-1 позволяет улучшить качество животноводческой продукции по основным показателям, получать обогащенную йодом продукцию. Однако он имеет сравнительно небольшой срок хранения [2,3].

Разработанный нами йодсодержащей препарат для лечения инфекционно-больных животных обладает высокими терапевтическими и антибактериальными свойствами.

Электрохимическая активация воды является динамично развивающимся направлением мировой промышленности. Технология ЭХА внедрена в РФ, США, Японии, Корее, Австралии, Германии и других странах. Принцип ЭХА воды используется для получения активированных фракций воды для дезинфекции, стерилизации (анолит), моющих фракций ЭХА воды (католит). В 1998г. в США на целевую программу замены дезинфектантов в перерабатывающей промышленности был затрачен 1 млрд долларов. Полученные электрохимически активированные растворы применяются в медицине - дезинфекция, предстерилизационная очистка, стерилизация изделий из различного материала. Получаемые электрохимически активированные растворы могут использоваться как дезинфицирующие, стерилизующие, моющие растворы, а также для профилактики и лечения ряда заболеваний. Основным преимуществом данных растворов перед традиционно применяемыми средствами являются их физиологическая безвредность, дешевизна и биосовместимость [5].

Электрохимически   активированные  растворы синтезируют из разбавленных (от 0,05 до 5,0 г/л) растворов неорганических веществ, в качестве которых чаще всего используют раствор хлорида натрия в питьевой  воде. Также  электрохимически   активированные  растворы можно готовить из дистиллированной или очищенной для гемодиализа  воды  с добавками химически чистого хлорида натрия или других электролитов.



Электрохимическая активация (ЭХА) привлекает все большее внимание специалистов различных отраслей и ученых возможностью безреагентного экологически чистого изменения кислотно-щелочных и окислительно-восстановительных свойств воды различной степени минерализации: от дистиллированной до сильно минерализованной. Сущность ЭХА - придание воде необходимых функциональных свойств перед использованием, в том числе придание ей каталитической и биокаталитической активности. Электрохимическая активация производится путем катодной или анодной (униполярной) электрохимической обработки воды в диафрагменном электрохимическом реакторе. Диафрагма в виде пористой диэлектрической перегородки между электродами реактора препятствует смешиванию объемов воды (или растворов) в анодной и катодной электродной камерах, но в то же время обеспечивает ионный обмен между этими объемами. При этом каждый микрообъем массы жидкости обрабатывается в электрическом поле сверхвысокой напряженности у поверх­ности электрода одной полярности при отсутствии перемешивания с жидкостью у электрода противоположной полярности. В результате указанного воздействия растворы переходят в термо­динамически неравновесное состояние и в течение 24 часов проявляют аномально высокую химическую активность, при этом раствор, обработанный в катодной камере (католит) обладает моющими свойствами, а раствор, обработанный в анодной камере (анолит), проявляет дезинфекционную активность. В катодной камере реактора вода насыщается продуктами катодных электрохимических реакций, обычно гидроксидами металлов, образовавшимися из растворенных солей, гидроксид-ионами, водородом. В момент и после катодной электрохимической обработки вода для упрощения обозначения характера оказанного на нее воздействия называется католитом. При анодной обработке на нерасходуемом электроде вода насыщается продуктами окисления, в том числе кислотами, синтезированными из растворенных солей, кислородом, хлором. В момент и после анодной обработки вода называется анолитом. Наличие устойчивых электрохимически синтезированных щелочей в католите и кислот в анолите не является признаком их актиаированности, как не являются им соответственно высокие и низкие значения рН католита и анолита, сохраняющие свое значение длительное время при хранении. Активированное состояние воды и растворов в результате униполярной электрохимической обработки проявляется в аномальной реакционной способности католита и анолита в окислительно-восстановительных реакциях, в их каталитической, биокаталитической активности, в аномальной физико-химической активности при взаимодействиях на границе раздела фаз и коррелирует с измеряемыми параметрами, такими, как pH, окислительно-восстановительным потенциалом (ОВП) поверхностным натяжением, диэлектрической проницаемостью, электропроводностью и другими. Значение рН в основном связано с одним из факторов активации - синтезом устойчивых веществ в традиционных процессах электролиза. Современные электрохимические активаторы позволяют получать 4 вида активированной воды:

  • кислотный анолит ( рН =<5)

  • нейтральный анолит ( рН = 6±1 )

  • щелочной анолит (рН= 7- 8)

  • нейтральный католит ( рН =7-8)

  • щелочной католит ( рН >8)/

Электрохимически активированные растворы получают из водопроводной води ГОСТ 2874 " Вода  питьевая" и пищевой попаренной соли ГОСТ 13830-84 или технической поваренной соли ТУ 18-11-65; растворы технической соли предварительно фильтруют через ткань для осво­бождения от шлака [6].

Применение ЭХАР в ветеринарной медицине возможно при наличии высокотехнологических установок и средств, позволяющих получать дезинфицирующие растворы со стабильными показателями их качества, а также пригодных для работы в условиях животноводства. Для электрохимической активации воды и слабых солевых рас­творов применяют специально сконструированный реактор РПЭ (реактор проточный электрохимический), позволяющий получать дезинфицирующие и стерилизующие растворы [7-8,9,10].



2. Методика проведения исследований

Изучая распространенность инфекционных болезей кроликов, сопровождающейся развитием: Staphylococcus aureus-, Staphylococcus albus-, Staph. еpidermidis-, E.coli- – инфекций, для выделения возбудителей проводили смывы с носового зеркала, анального отверствия. Для этого из пяти кроликах проводили смывы стерильным физиологически раствором и помещали в пробирки, а после тщательного их взбалтывания и отстаивания в течение 30 минут, центрифугировали при 1500 оборотов в течение 20 мин проводили посевы. Надосадочную жидкость пастеровской пипеткой высевали на питательные среды: МПБ, МПА, Кит - Тароци, Сабуро. Для накопления бактериальной массы эшерихий использовали среду Хотингера. Выделенные культуры Staphylococcus aureus, E.coli подвергали микроскопированию с использованием светового микроскопа. После рекультивации E.coli на среде Хотингера и питательной среде для выращивания кишечной палочки (Среда ВК) содержащей в литре дистиллированной воды: лимонную кислоту, хлористый натрий, сернокислый магний, фосфорнокислый калий двухзамещенный, сернокислое железо, аспарагин, глюкозу, глицерин, ее использовали для изучений бактерицидных свойств электрохимических растворов и йодпротектина. С этой целью наносили взвесь E.coli в дозе 1см3 с концентрацией 2-3млн. микробных клеток на тест объекты (деревяные квадратные дощечки размером 10,0 х10,0 см). После 2 часовой выдержки наносили нативный электрохимический раствор и разведенные 1:50, 1:70, 1:80, 1:99 растворы йодсодержащего препарата йодпротектин на высохшие дощечки с культурой эшерихий в дозах 10.0 мл. с использованием распылителя Росинка. Изучение ультратонких срезов микроорганизмов при воздействии на них ЭХАР АКВАЭХА проводили по методике А.В. Иванова, А.А. Иванова и др., используя в качестве модели полевой штамм E. coli. Осадок суточных бульонных культур E. coli после заданной нами экспозиции с ЭХАР АКВАЭХА (рН 6,5, сод. акт. Сl2 500 мг/л, ОВП – 700 мВ) получали центрифугированием, заключали в агар-агар, вырезали и фиксировали в 1% растворе глутарового альдегида (SERVA, Германия) на 0,1 М фосфатном буфере рН 7,4 12 час в холодильнике с последующей фиксацией в 2% растворе четырёхокиси осмия на том же буфере в течение 2 ч при комнатной t0. После дегидратации образцы заключали в смесь эпоновых смол (Epon-812, MNA, DDSA, SERVA, Германия). Ультратонкие срезы получали на микротоме LKB-3 и изучали в электронном микроскопе JEM 100СХ-2 («Jeol», Japan). Фотофискацию проводили на фототехническую плёнку AGFA ORTHOCHROMATIC. Для получения микрофотографий использовали сканирование негативов на сканере EPSON PERFECTION 4990 PHOTO с разрешением 600 dpi.



3. Результаты исследований

При изучении распространенности инфекционных болезей у кроликов (n=5) были выделены культуры Staphylococcus aureus, Staph. еpidermidis, E.coli в смывах носового зеркала, анальных отверствий. После нанесения взвеси E.coli в дозе 1,0 см3 с концентрацией 2-3млн. микробных клеток на тест объекты (деревяные квадратные дощечки размером 10,0 х10,0 см) и 2 часовой выдержки, а также наносения нативного электрохимического раствора и разведенных 1:50, 1:70, 1:80, 1:99 растворов йодсодержащего препарата йодпротектин на высохшие дощечки с культурой эшерихий в дозах 10.0 мл. с использованием распылителя Росинка, изучали антибактериальные свойства ЭХАР и Йодпротектина . При изучении ультратонкой картины действия на микроорганизмы E. coli при контакте с электрохимическим раствором ЭХАР АКВАЭХА (рН 6,0, сод. акт. Cl2 500 мг/л, ОВП -700 мВ) и йодпротектином (при разведении1:50, 1:70, 1:80, 1:99) при экспозиции 5 и 20 мин. в сравнении с интактными бульонными культурами и культурами при действии на них свежеприготовленного 3% раствора карболовой кислоты позволили заключить, что уже соответственно через 5 и 10 мин. происходит денатурация цитоплазмы E. coli при контакте культур с ЭХАР и йодпротектином, а также в контрольных исследованиях (через 3 мин) при воздействии на них 3% раствора карболовой кислоты. При экспозиции 20 мин. с ЭХАР и йодсодержащим препаратом (1:50 и 1:99) происходит усиление изменения цитоплазмы, конденсирование внутрицитоплазматических компонентов, увеличение периплазматического пространства, разрыв и лизис клеток, что представлено на рис. 1-3.





  • Рис. 1. Контроль – суточная бульонная культура E. сoli





  • Рис. 2. Действие йодпротектина в разведениях (1:50 и 1:99) на E. сoli через 5 мин.





  • Рис. 3. Действие ЭХАР АКВАЭХА (рН 6,0, сод. акт. Cl2 500 мг/л, ОВП

  • -700 мВ) E. сoli через 5 мин.

Были отработаны методические подходы по профилактическим обработкам кроликов ежедневно в течение 4-12 дней, а лечебные мероприятия - ежедневно, в течение 8-15 дней в терапевтических дозах до полного выздоровления. Для орошения носовых перегородок, наружных половых органов, долей молочной железы, кожи и шерстного покрова использованы были йодсодержащий препарат в разведении 1:50, 1:70, 1:80, 1:99 с профилактической и 1:20, 1:10, 1:5 и нативную препаративную форму с лечебной целью. В опыте использовано для определения профилактической эффективности от 50 до 100, с лечебной целью от 30 до 80 кроликов [4]

Таблица 1. Эффективность лечения кроликов больных инфекционными заболеваниями с помощью йодсодержащих и электрохимических растворов


№ п/п

Инвентарный №

Поражения носоглотки

Изолировано возбудители

Схема лечения

Результаты лечения (% выздоровевших)

Выявленные микроорганизмы

Фибринозные

Гнойно-фибринозные

1


01 - 24


+

+

S. aureus, S.еpidermidis, E.coli

A

99

-

2

25 -47

+

+

S. aureus, S.еpidermidis, E.coli

B

82

-

3

47 - 60

+

+

S. aureus, S.еpidermidis, E.coli

C

74

S.еpidermidis

4

60 - 91

+

+

S. aureus, S.еpidermidis, E.coli

D

69

S.еpidermidis
*А-разведение Йодпротектина 1:50,B- 1:70, C- 1:80 ,D- 1:99

Таблица 2. Эффективность лечения животных с поражениями слизистых оболочек носа, ротовой полости йодсодержащими препаратами и электрохимическими растворами

№ п/п


Инвентарный №

Клинические изменения в ротовой полости

Изолированые возбудители

Нативный раствор

Результаты лечения(% выздоровевших)

Выявленные микроорганизмы после лечения

Пустулезная сыпь


Геморрагические поражения

1

92-104

+

+

S. aureus, S.еpidermidis, E.coli

Электрохимический

83

-

Изучение гематологических, биохимических и иммунологических показателей.

При первом исследовании до применения препаратов, равно как и при последующих, концентрация общего белка и его фракций, за исключением γ-глобулинов, в сыворотке крови контрольной и подопытной групп оставалась в пределах физиологической нормы (таб. 1). Уровень ɤ-глобулинов был понижен в опытной группе на 41,2% и в контрольной на 45,8%.

Таблица 3. Содержание общего белка и его фракций у контрольной и подопытной групп при применении Йодпротектина

Показатели

Начало опыта

Средина опыта

Конец опыта

Общий белок

г/л


77,9+1,4

82,7+0,4

80,21,5

78,0+0,8

77,9+0,8

76,6+2,7

Альбумин, г/л

33,44+0,9

32,6+0,4

32,9+1,3

34,6+0,6

35,6+0,6

36,2+0,8

α-глобулин, г/л

15,2+0,9

15,8+0,2

15,1+0,74

16,6+0,5

17,6+0,8

16,2+0,3

β-глобулин,

г/л


14,4+0,4

15,8+0,2*

15,2+0,3

13,0+0,6

13,1+0,6

13,2+2,3

γ-глобулин,

г/л


14,1+1,2

18,6+1,2*

18,8+1,0*

13,0+0,6

11,2+0,7

10,7+0,68

Примечание: * – разница статистически достоверна между показателями контрольной и подопытной групп в данный период исследований при р≤0,05

Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы;

нижняя строка - показатели контрольной группы.

Концентрация иммуноглобулинов класса M была понижена на 8,0% у опытной группы и на 16,0% у контрольной, а также наметилась тенденция к снижению IgG относительно нижней границы физиологической нормы (таб. 2). Снижение активности лизоцима составило 27,0% и 29,0% соответственно.



Таблица 4. Показатели резистентности контрольной и подопытной групп при применении препарата Йодпротектин

Показатели

Начало опыта

Средина опыта

Конец опыта

Иммуноглобулин G, мг/мл

12,4+0,6

14,6+0,6

14,7+0,76

12,9+0,5

12,5+0,5

11,3+1,4

Иммуноглобулин M, мг/мл

2,3±0,2

2,6+0,2

2,7+0,04

2,1+0,1

2,16+0,14

2,0+0,16

ЦИК, мг/мл

0,16+0,008

0,17+0,008

0,17+0,006*

0,17+0,006

0,16+0,003

0,15+0,004

Серомукоиды, мг/мл

0,17+0,01

0,14+0,008

0,14+0,003*

0,17±0,01

0,16±0,004

0,18+0,006

Лизоцим, мкг/мл


43,8+2,0

48,0+1,4

53,2+1,4*

42,6+2,2

45,0+4,3

45,0+2,0

30,6+1,2

32,2+1,1

28,9+0,9

Кислотная емкость, мг%

376+12,0

408+4,0*,**

428±12,0*

352+8,0

348+12,0

350±12,0

Активность фагоцитоза

ФИ, %

52,2±1,6

54,8±1,2

60,2±2,8*,

51,4±2,0

50,0±2,0

47,6±2,60

ФЧ, ед.

3,9±0,14

4,2±0,12*

4,5±0,12*

3,68±0,16

3,6±0,12

3,5±0,1

КЗФ. ед

2,5±0,16

2,86±0,14

3,20±0,14

2,4±0,08

2,68±0,14

2,70±0,12

Примечание: * – разница статистически достоверна между показателями контрольной и подопытной групп в данный период исследований при р≤0,05

** – – разница статистически достоверна межу показателями подопытной групы в данный и предыдущий период исследования.

Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы;

нижняя строка - показатели контрольной группы.

О нарушении кислотно-основного гомеостаза у животных свидетельствует снижение кислотной емкости сыворотки крови на 10,5% в опытной и 19,0% в контрольной группе относительно нижней границы нормы. Показатель фагоцитарной активности – фагоцитарный индекс, который указывает на долю нейтрофилов, захвативших микроорганизмы, были приближены к нижней границе физиологической нормы. В то же время фагоцитарное число – среднее число микроорганизмов, поглощенных одним нейтрофилом – было снижено относительно нижней границы нормы в обеих группах. Концентрация ЦИК оставалась в пределах физиологической нормы на протяжении всего опыта.

Полученные данные (таб. 3) свидетельствуют о определенном напряжении в системе ПОЛ-АОЗ. Так, уровень конечного продукта ПОЛ – МДА превышает физиологически нормальный уровень на 30,7% у животных опытной группы и на 17,6% – у контрольной. В то же время, несмотря на соответствие концентрации витамина Е и активности каталазы физиологической норме, у коров обеих групп снижена общая антиокислительная активность (АОА) липидов сыворотки крови на 12,0% и 14,2% соответственно.

Таблица 5. Биохимические показатели контрольной и подопытной групп при применении электрохимического раствора

Показатели

Начало опыта

Средина опыта

Конец опыта

Витамин Е, мкг/мл

9,1+0,7

10,7+1,2

12,0±0,6*

9,8+0,5

8,9+0,84

9,3+0,7

Оксид азота, мкмоль/л

9,4+0,5

11,6+0,4*

12,4+0,48*

9,4+0,4

8,8+0,5

8,9+0,7

Каталаза,

нмоль н2о2 секхмг белка



30,9+1,0

35,4+0,6*

37,0+1,6*

31,1+0,6

32,5+0,8

29,6+0,5

ДК, мкмоль/л

21,2+0,5

19,6+0,4

18,5+0,4*

19,6+0,9

21,2+0,5

21,7+0,7

МДА, ∆/Д

2,0+0,04

1,8+0,06*

1,6+0,06

1,8+0,06

2,0+0,04

1,9+0,1

АОА, % ингибиции

31,6+1,3

36,6+1,2

37,3+1,46*

30,6+1,2

32,2+1,1

28,9+0,9

Примечание: * – разница статистически достоверна между показателями контрольной и подопытной групп в данный период исследований при р≤0,05

Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы;

нижняя строка - показатели контрольной группы.

При исследовании гематологических показателей (таб. 4) в обеих группах был установлен сдвиг лейкоцитарной формулы влево – количество палочкоядерных нейтрофилов было выше верхней границы нормы в среднем около на 126% (в 2,26 раза), а уровень сегментоядерных нейтрофилов был снижен на 22,0% относительно нижней границы нормы. Процент моноцитов у животных опытной группы был повышен на 31,4%, а контрольной – на 37,1% относительно верхней границы физиологической нормы.

Таблица 6. Гематологические показатели контрольной и подопытной групп при применении электрохимического раствора

Показатели

Начало опыта

Средина опыта

Конец опыта

Лейкоциты,

Т/л


8,7±0,2

7,8±0,3*

6,8±0,3*

9,4±0,5±

9,7±0,6

9,4±0,4

Лейкоцитарная формула,%

П

13,2±0,8

9,4±0,6*,**

7,4±0,6*

13,6±0,6

13,4±0,6

13,2±1,0

С

27,6±1,6

34,6±3,0*

38,6±1,0*

27,0±2,2

24,6±1,2

22,6±1,8

Э

6,0±0,8

5,4±0,8

5,2±0,7

6,6±0,8

7,2±0,4

7,0±0,6

Б

0







0







М

9,2±0,8

7,2±0,4*

6,4±0,6*

9,6±0,6

9,8±0,8

10,4±0,8

Л

42,2±3,48

45,2±4,0

43,2±1,0

43,2±3,0

43,0±2,6

42,8±1,0

Примечание: * – разница статистически достоверна между показателями контрольной и подопытной групп в данный период исследований при р≤0,05

** – – разница статистически достоверна межу показателями подопытной групы в данный и предыдущий период исследования.

Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы;

нижняя строка - показатели контрольной группы.

При взятии крови после начала лечения (средина опытна) у животных опытной группы установлено статистически достоверное повышение уровня ɤ-глобулинов на 66,6% относительно показателей контрольной группы и на 31,9% по сравнению с предыдущими показателями в этой группе, концентрация иммуноглобулинов у кроликов этой группы также возрастала: Ig G на 13,0% и 20,3% – IgM на 17,7% соответственно.

О снижении иммуносупрессии в организме кроликов, подвергавшихся лечению, свидетельствует снижение уровня серомукоидов на 17,6% по сравнению с предыдущими показателями, и на 12,5% относительно показателей контрольной группы в этот период исследовании.

Об определенной активизации ферментативного звена антиоксидантной защиты при лечении свидетельствует незначительное повышение активности каталазы – на 14,6% и АОА – на 15,8% относительно предыдущих показателей и на 8,9% и 13,7% по сравнению с контрольными значениями в этот период опыта. По-видимому, это обусловило тенденцию к снижению концентрации продуктов ПОЛ – ДК и МДА (на 7,5% и 10,0% относительно контроля). Лечение способствовало нормализации кислотно-основного равновесия в организме кроликов – кислотная емкость повысилась на 8,5% и достигла физиологической нормы.

Применение электрохимического раствора также способствовало изменению лейкоцитарной формулы – у коров снизился процент палочкоядерных нейтрофилов (на 29,8% ) и моноцитов (на 21,7%) (р≤0,05), также на 10 % снизилось количество лейкоцитов в крови.

При лечении повысилось продуцирование оксида азота, на что указывает увеличение его концентрации на 23,4% относительно предыдущих показателей и на 31,8% по сравнению с контролем. Применение препарата положительно повлияло на активность фагоцитоза, о чем свидетельствует тенденция к повышению фагоцитарной активности нейтрофилов, и статистически достоверное повышение фагоцитарного индекса на 16,6%.

У животных этой группы повысилась также активность лизоцима – на 11, 6% относительно предыдущих показателей и на 6,6 % относительно контроля на фоне аналогичного повышения этого показателя у коров контрольной группы по сравнению с первым взятием крови.

После заключительного отбора крови зафиксирована некоторая стабилизация ряда иммунобиохимических показателей крови у кроликов опытной группы на фоне их ухудшения у животных контрольной группы. В частности, у кроликов контрольной группы продолжалось снижение уровня ɤ-глобулинов, IgG, IgМ, и повышение серомукоидов, при этом разница между показателями групп составляла 66,1%, 16,8% 20,4% (р≤0,05) и 12,5% соответственно.

Лечение способствовало снижению расходования витамина Е – его уровень у кроликов опытной группы превысил средний показатель контрольной группы на 29,0% (р≤0,05). У животных опытной группы была выше контроля активность каталазы на 25,0%, а также АОА липидов сыворотки – на 29,1%.

В этот период опыта продолжилась тенденция к снижению интенсивности ПОЛ, зафиксированная на предыдущем сроке исследования: разница между средними показателями уровня ДК и МДА у коров обеих групп составила 14,7% и 15,8% соответственно.

Усилилось влияние лечения и на состояние кислотно-основного гомеостаза животных, на что указывает повышение кислотной емкости у животных опытной группы на 22,3% по сравнению с контролем.

В этот период опыта у животных опытной группы продолжалось снижение количества лейкоцитов в крови (относительно показателей группы контроля на 27,6%), доли палочкоядерных нейтрофилов, эозинофилов и моноцитов (их процент ниже контроля на 51,5% 25,7% и 38,5 соответственно). При этом в крови возрастало количество сегментоядерных нейтрофилов – уровень был выше у животных опытной группы на 70,7% по сравнению с контролем.

Также повышалась интенсивность фагоцитарной реакции нейтрофилов, о чем свидетельствует повышение ФА (на 9,8% по сравнению показателем предыдущего исследования и на 26,4% относительно контроля), ФИ (на 6,1% и 28,1% соответственно) и КЗФ (на 11,9 и 18,5% соответственно). Также со времени предыдущего исследования у кроликов опытной группы незначительно усилилось продуцирование оксида азота – разница между предыдущими показателями по группе составила 6,8%, по сравнению с контрольными в этот период – 39,3% (р≤0,05).

Эти данные согласуются с данными по увеличению активности лизоцима, продуцентом которого являются моноциты, обладающие фагоцитарной активностью. Активность лизоцима у животных опытной группы по сравнению с предыдущим исследованием крови повысилась на 10,8%, а относительно контрольных показателей зафиксировано статистически достоверное повышение – разница составила 66,7%.

Таким образом необходимо отметить, что исходя из полученных данных можно констатировать снижение защитных сил организма животных вследствие действия сезонных стресс-факторов, развития острых вирусных инфекций что привело к увеличению заболеваемости бактериальными инфекциями. Применение разработанного препарата Йодпротектин и электрохимического раствора, прямо или косвенно, способствовало улучшению иммунобиологического статуса подопытных животных.



Заключение

Среди поголовья условно здоровых кроликов чаще всего выделяются культуры Staphylococcus aureus, Staph. еpidermidis, E.coli в смывах из носового зеркала и анальных отверствий. Электрохимические нативные растворы и йодпротектин ( в разведении 1:50, 1:70, 1:80, 1:99) после нанесения их на E.coli (с концентрацией 2-3млн в 1,0 см3) при 2 часовой выдержке в полной мере обеззараживали микроорганизмы, что подтверждено денатурация цитоплазмы E. coli при контакте культур с ЭХАР и йодпротектином уже через 5 и 10 мин соответственно. А уже через 20 мин. происходит усиление изменения цитоплазмы, конденсирование внутрицитоплазматических компонентов, увеличение периплазматического пространства, разрыв и лизис клеток.

Сравнительное изучение лечебного и профилактического воздействия йодсодержащих и электрохимических растворов показало наибольшую эффективность йодпротектина в разведении 1:50, позволившего выздороветь 99% кроликов имевших S. aureus, S.еpidermidis, E.coli – инфекций. Незначительными терапевтическими свойствами(69%) обладал Йодпротектин в разведении 1:99. Нативные электрохимические растворы обеспечивали выздоровление 83% инфицированных животных.

С профилактической целью необходимо проводить обработки нативными электрохимическими растворами в течении 4-5 дней, а с лечебной 10-12. Йодсодержащие разведения Йодпротектина (1:50) необходимо применять с лечебной целью 8-15 дней, а с профилактической 4-8.



Список использованных источников

  1. Бреславец В.М., Коваленко А.М., Хохлов А.В., Белогурова Н.А. Применение препарата «Йодпротектин» для лечения хронических эндометритов различной этиологии у коров // Материалы 13 международной научно-производственной конференции (19-22 мая 2009 года), Белгород.- Изд. БелГСХА, 2009, стр. 52-53.

  2. Коваленко А.М., Евглевский Д.А., Евглевский Ан.А. Новые подходы к лечению репродуктивних органов и молочной железы // Вестник КГСХА., Курск., №5, 2010, стр. 75-76.

  3. Хачко В.И., Бреславец Е.М., Коваленко А.М. Решение проблем

безплодия крупного рогатого скота, вызванных инфекционными заболеваниями, поражающими репродуктивне органы и молочную железу // Бюллетень научных работ., Выпуск N 19 Белгород.- Изд. БелГСХА, 2009, стр. 17-19.

  1. Положительное решение Института промышленной собственности Российской Федерации на выдачу патента „Дезинфицирующие средства йодпротектин” авторы Коваленко А.М., Дорофеев А.Ф. от 29.05. 2011., № 2012121677 (032839).

  2. Инструкция по применению средства дезинфицирующего «АКВА-ЭХА», получаемого на установке для электрохимического синтеза активированных дезинфицирующих растворов «АКВА-ЭХА», производства ООО НПП «ИЗУМРУД» (Россия) для целей дезинфекции на предприятиях молочной промышленности.-М.,2008.- 12с.

  3. Методические рекомендации по применению  электро­химически   активированных  растворов хлорида натрия с целью дезинфекции животноводческих объектов, РАСХН //Закомырдин А.А., Незлобин В.П., Яблочкин В.Д. и др.-М.,1995.-19с.

  4. Методические указания по применению нейтрального анолита АНК, вырабатываемого в установке СТЭЛ-10Н-120-01, для целей дезинфекции, предстерилизационной очистки и стерилизации. Разрешение Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России от 14 февраля 1997г., № МУ-17-1

  5. Наставление по применению электрохимически активированных растворов натрия хлорида (католита и анолита), получаемых на установках типа СТЭЛ, для мойки и дезинфекции в ветеринарии и животноводстве.-Утв. Деп. ветеринарии МСХиП РФ.-1999.-2с.

  6. Применение электроактивированной воды в птицеводстве: Методические рекомендации / В.И.Филоненко, В.Г.Шоль, В.И.Фисинин и др.-Сергиев Посад,1995.-46 с.

  7. Применение электроактивированной воды в технологических процессах птицеводства.- Сергиев Посад, 2007.-54с. есть «ИЗУМРУД»)




База данных защищена авторским правом ©zubstom.ru 2015
обратиться к администрации

    Главная страница