Профилактическое действие в полости рта сахарозаменителей и особенности их метаболизма



страница1/4
Дата26.06.2015
Размер0,88 Mb.
  1   2   3   4


На правах рукописи

ЗУБЦОВ Валерий Александрович


ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ В ПОЛОСТИ РТА

САХАРОЗАМЕНИТЕЛЕЙ И ОСОБЕННОСТИ ИХ

МЕТАБОЛИЗМА

(Экспериментальное исследование)

Специальность 14.01.14 - стоматология

03.01.04 - биохимия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук

Тверь - 2010

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Тверская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» на кафедрах пародонтологии и биохимии, Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московский медицинский стоматологический университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» на кафедре биохимии и в Государственном научном учреждении ВНИИМЛ Россельхозакадемии.



Научные консультанты:

доктор медицинских наук, профессор Румянцев Виталий Анатольевич

заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, профессор Петрович Юрий Александрович


Официальные оппоненты:

Академик РАМН, доктор медицинских

наук, профессор Леонтьев Валерий Константинович

Доктор медицинских наук, профессор Петрикас Арнольд Жанович

Доктор медицинских наук, профессор Терехина Наталья Александровна


Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации»

Защита состоится «____» «____________» 2010 г. в____часов на заседании диссертационного совета Д 20 8.099.01 при ГОУ ВПО Тверская ГМА Росздрава по адресу: 170100, Тверь, ул. Советская, д.4


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Тверской государственной медицинской академии и на сайте www.tvergma.ru

Автореферат разослан «____» _______________2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат медицинских наук, доцент Мурга В.В.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность научного исследования

Кариес зубов – одна из основных проблем стоматологии, не только медицинская, но и социальная [В.К. Леонтьев, 2003; .В.Безрукова,2005;В.В. Корчагина, 2008;Э.М.Кузьмина и др., 2009; Slayton, 2006; Allais, 008].Значение проблемы выходит за пределы стоматологии. Интерес к ней достаточно велик, решить ее пытаются ученые всего мира. Последствия кариеса серьезно сказываются на здоровье людей и могут привести к нарушениям желудочно-кишечного тракта и других систем. Пораженность кариесом населения в большинстве стран зависит от особенностей питания [В.К. Леонтьев, 2000; В.Я Яковлева, 2005], гигиены полости рта, противокариозной профилактики [О.Г. Аврамова, 2005] и других факторов. Замена части углеводов, легко ферментируемых в полости рта, на сахарозаменители (подсластители) ведет к снижению пораженности кариесом [В.О.Бокая,1993; Б.Н.Давыдов,2008; Л.К. Губина и др., 2008; Э.М. Кузьмина и др., 2009]. Высокие значения КПУз можно объяснить невыпол-нением правил гигиены полости рта и недостаточным применением сахарозаменителей и избытком углеводов в пищи, легко ферментируемых в полости рта у большинства жителей России. Пищевые сахарозаменители успешно применяют не только стоматологи, но и в профилактике и терапии сахарного диабета, ожирения, а также у здоровых людей.

Основа сахарозаменителей с неспецифическими механизмами стимуляции секре-ции слюны - повышение ее защитных свойств. Это приводит к повышению нейтрали-зующих свойств и минерализующего потенциала слюны, что способствует быстрому восстановлению в зубной бляшке концентрации ионизированного кальция и рН, нарушенных под влиянием сахарозной нагрузки.

Следует отметить, что к числу самых актуальных проблем в стоматологии всего мира относится кариес зубов у детей [А.В. Ковалевская, 2001; О.Г.Аврамова,2005; Е.В. Мамаева,2007; В.В. Корчагина, 2008; В.М. Елизарова, 2009; Axelsson, 2006; Kataoka, et al., 2007]. Показано, что с целью устранения осложнений при потреблении легко переварива-емых сахаров предложили применять безвредные пищевые вещества – сахарозаменители и подсластители - и добровольно отказаться от потребления избытка сахарозы. В клинике используют их в терапии сахарного диабета и ожирения, а также с профилактической це-лью здоровые люди [В.В. Корпачев, 2004]. Интерес практиков и теоретиков к этой проб-леме не угасает, что ежегодно подтверждается тысячами публикаций в журналах и докладов на конгрессах, симпозиумах, конференциях по этой тематике.

Хотя содержание в пищи человека большого количества легко перевариваемых в, но и полости рта углеводов имеет не только кариесогенное диабето-, и атерогенное значение, в работе в основном рассматриваются аспекты применения сахарозаменителей в стоматологии.

В полости рта углеводы, в первую очередь сахароза и глюкоза, легко ферментиру-емые с помощью сахаразы и энзимов гликолиза микроорганизмов зубного налета и сме-шанной слюны, превращаются в пировиноградную, молочную и другие органические кис-лоты, деминерализующие эмаль зуба. В процессах окислительного декарбоксилирования пировиноградной кислоты и интермедиатов цикла трикарбоновых кислот (ЦТК) выделяются 3 молекулы СО2, участвующие в синтезе карбонатапатита Can (PO4)5 CO3 и карбо-натгидроксиапатита – Can (PO4)5 CO3 (OH)2 и ещё более растворимого в органических ки-слотах, чем гидроксиапатит - Can (PO4)5 CO3 (OH)2 (Ю.А. Петрович, Р.П. Подорожная, С.М. Киченко, 2004).

Также доказано, что из глюкозы и фруктозы, образующихся при гидролизе сахарозы сахаразой микроорганизмов ротовой полости (РП), с помощью гликозилтрансферазы синтезируются липкие полисахариды зубного налета (ЗН) – глюканы и фруктаны, способ-ствующие задержке микроорганизмов в ЗН и адгезии ЗН на поверхности эмали зуба и дальнейшему развитию кариеса.

Однако локальными факторами нельзя ограничить все многообразие этиологии и патогенеза кариеса зубов. Роль слюны, зубного налета, микроорганизмов и химического состава эмали зуба в его развитии занимает важное место [В.К. Леонтьев, 1999; В.Ф. Воронин, 2000; Н.Н. Петрищева, Л.Ю. Орехова, 2002; Е.Н. Иванова, А.М. Петрова, 2007; Ю.М. Максимовский и др., 2007; В.Г. Сунцов, 2009].

Проблема биохимической, в том числе ферментной адаптации к несбалансированному питанию имеет огромное значение. Она должна находится под пристальным вниманием стоматологов, биохимиков, клиницистов разных профилей, специалистов по питанию, работников пищевой промышленности. Высокая актуальность данной проблемы для теоретической и практической медицины очевидна.

Избыток рафинированных углеводов, преимущественно сахарозы в пище населения России и ряда стран, привел в последнее десятилетие к росту заболеваемости кариесом, атеросклерозом, ожирением, панкреатическим диабетом и некоторыми видами патологий.

В молодом возрасте у людей большая предрасположенность к развитию кариеса, чем в старшем. Четко это видно и у грызунов, в частности у крыс и хомяков. Именно из-за этого они часто служат экспериментальной моделью кариеса.

Роль слюны, зубного налета, микроорганизмов и химического состава эмали зуба в развитии кариеса занимает очень важное место [И.А. Бегельман, 1964;Ю.А. Петрович, 1966;В.Ф.Воронин, 2000; C.Б.Жерлицына, 2005; Ю.В.Полякова, 2008] и лечения [В.К. Леонтьев, Г.Н. Пахомов, 2006; П.А. Леус, 2008, Manji, Fejrskova, 1994; Slayton, 2006].

В ряде случаев профилактика и терапия кариеса зубов недостаточно эффективны [В.А. Румянцев, 1999]. Высокая актуальность данной проблемы для теоретической и практической медицины очевидна. В связи с этим углубленное изучение патогенеза кариеса зубов, получение новых фактов, поясняющих неизвестные стороны его развития, на основе которых разрабатываются методы профилактики и лечения с использованием сахарозаменителей, в особенности растительного происхождения, является весьма актуальным и перспективным.

Однако на сегодняшний день остается неизученным влияние сахароспиртов с различной концентрацией (от 10 до 54%) в суточном рационе животных в хронобиологическом аспекте (весна, лето, осень, зима), изменение веса тела и массы печени и содержание белка. Не изучены в эксперименте активность ферментов и изоферментов, а также содержание ПВК, МК и АТФ в слюне, сыворотке крови, слизистой оболочке полости рта, печени в вышеописанных условиях. Неизвестны факты, оказывающие сахарозой, сорбитолом и ксилитолом на остеоиндуктивную активность нижнечелюстной кости белых крыс.

Поэтому необходимо изучить в сравнительном плане влияние сахарозы, сорбитола, ксилитола на биохимические показатели смешанной слюны, сыворотки крови, слизистой оболочки полости рта и печени здоровых крыс, находящихся на различных диетах с содержанием сахарозы, сорбитола, ксилитола от 10% до 54% в суточном рационе питания, изучить влияние сахарозы, сорбитола и ксилитола на остеоиндуктивную активность нижнечелюстной кости белых крыс, изменения рН смешанной слюны и некоторые физико-химические показатели (рН, вязкость, скорость слюноотделения, послевкусие), характеризующие свойства слюны. Вышесказанное является актуальным и, несомненно, будет полезным как для теории, так и для практической стоматологии. В связи с вышеизложенным были поставлены следующая цель и задачи данного исследования.

Цель исследования: Повысить эффективность профилактики кариеса зубов в экспериментальном и клинико-лабораторном исследовании с использованием сахароспиртов и дитерпеновых гликозидов.

Задачи исследования:


  1. В ходе экспериментальных исследований изучить в разные периоды года (хронобиологический аспект) массу тела, печени и содержание белка у белых крыс разного возраста, получавших от 10% до 54% сахарозы, сорбитола, ксилитола в течение одного месяца в разные сезона года (весна, лето, осень, зима), а также в течение 3-х месяцев и через 3 месяца после отмены диеты.

  2. В ходе экспериментальных исследований изучить влияние различных доз сахарозы и вышеперечисленных сахарозаменителей у этих животных на активность ЛДГ, Гл-6-ФДГ, СДГ, МДГ и СуДГ на содержание лактата, пирувата и уровень АТФ в слюне, тканях и в крови в выше указанных сериях опытов.

3. В ходе эксперимента изучить влияние сахарозы и сахарозаменителей на остеоиндуктивную активность нижнечелюстной кости белых крыс.

4. В клинико-лабораторных исследования сопоставить и изучить у людей – добровольцев биохимические параметры и физико-химические свойства смешанной слюны под действием сахарозы и сахарозаменителей: сорбитола, ксилитола и дитерпеновых гликозидов – «стевиозид» после полоскания в полости рта в течение 30с 15 мл раствора.

5. Разработать новую технологию выделения сахарозаменителя – «стевиозид» из растения Stevia rebaudiana Bertoni, выращенного в средней климатической зоне России.

6. Проверить влияние комплекса солевых смесей с водным раствором 0,25% стевиозида в профилактике кариеса зубов у молодых крыс.

7. Разработать новый способ получения казаминовых кислот - стимуляторароста для успешного районирования бразильского растения стевии и повышения урожайности Стевии.

8. Разработать рецептуру нового зубного эликсира, содержащего сахарозаменитель - стевиозид для внедрения с профилактической целью при заболеваниях полости рта и кариеса зубов и провести предварительные исследования по эффективности предлагаемого зубного эликсира.

9. Предложить разработанную нами жевательную резинку, содержащую сахарозаменитель – стевиозид, с целью повышения эффективности профилактики кариеса зубов и заболеваний слизистой полости рта и провести предварительные клинико-лабораторные исследования по эффективности предлагаемой жевательной резинки «Сила и Блеск».

Научная новизна. 1. Впервые получены новые факты, отражающие участие сахарозы и сахарозаменителей в нарушении углеводного обмена у крыс и поддержания слюной гомеостаза в ротовой полости.

2.Впервые изучены сезонные и возрастные изменения активности ферментов: ЛДГ, Гл-6-ФДГ, СДГ, изоферментов - ЛДГ, МДГ, уровня метаболитов ПВК, МК обмена углеводов, энзимов ЦТК, МДГ, СуДГ, содержании АТФ и белка в слизистой оболочке полости рта белых крыс, печени, крови и слюне лабораторных крыс под влиянием различных квот от 10% до 54% сахарозы и сахарозаменителей.

3.Разработан новый способ, получения сахарозаменителя стевиозида из листьев субтропического растения Стевия, выращенного в средней полосе России. Патент РФ № 211969 от 1998 г.

4.Разработан новый способ получения из казеина молока казаминовых кислот, стимулирующих рост растений, в том числе Стевии. Патент РФ № 2111969 от 2000 г.

5.Разработана рецептура эликсира для профилактики заболеваний полости рта, содержащего сахарозаменитель стевиозид. Патент РФ № 2264499 от 2005 г.

6.Впервые получены новые данные о влиянии сахарозы и сахарозаменителей на остеоиндуктивную активность нижнечелюстной кости и ее способность к регенерации.

7.Впервые показано, что дитерпеновые гликозиды оказывают быстрое восстановление рН слюны после применения раствора сахарозы, вызывающего длительный и стойкий ацидоз, что говорит о возможности использования дитерпеновые гликозиды в профилактике кариеса зубов (концепция профилактического действия дитерпеновых гликозидов сахарозаменителя – «стевиозида» в профилактике возникновения кариеса зубов).

8. Впервые получены новые данные о положительном профилактическом действии комплекса солевых смесей в сочетании с растительным сахарозаменителем стевиозидом полученным из стевии выращенной в средней полосы России.

9.Получены новые данные о лечебно-профилактическом эффективном действии предлагаемого рецепта зубного эликсира.

10.Впервые предложена жевательная резинка «Сила и Блеск» с дитерпеновыми гликозидами (полученных по нашему патенту) и получены положительные результаты по восстановлению КЩР в смешанной слюне у студентовобровольцев.

11. Производители и стоматологи наряду с хорошим лечебным эффектом сахароспиртов, как правило, не указывают на отрицательные стороны их действия на организм. Мы также указали на эти стороны их действия.

Теоретическая ценность работы. 1. Впервые изучены особенности влияния сахарозаменителей на общее состояние: массу тела, массу печени и содержание белка, активность ферментов и уровень метаболитов углеводного обмена в полости рта у животных, получавших в разное время кариесогенную (сахарозную) диету в комплексе с разным процентным соотношением сахароспиртов (сорбитола и ксилитола) в пище в разные сезоны года (осень, зима, весна, лето).

2. Выявлена зависимость между пищевыми рационами, сезонами, возрастом и активностью ферментов и уровнем метаболитов на развитие кариеса у крыс. Показаны особенности влияния различных доз сахарозаменителей на углеводный обмен у животных, находящихся различное время на диете или после ее отмены.

3.Впервые показано влияние сахарозы и сахарозаменителей на остеоиндуктивную активность нижнечелюстной кости.

4. Впервые сопоставлены параметры биохимических изменений при пероральном введении сахарозы, ксилитола, сорбитола, дитерпеновых гликозидов.



5. Созданы рецептуры зубного эликсира и жевательной резинки с использованием дитерпеновых гликозидов, показавших определенный кариеспрофилактический эффект как на животных, так и на студентах- добровольцах.

Практическая значимость работы

  1. Впервые в эксперименте на основе биохимических данных изучены особенности влияния современных сахарозаменителей на массу тела, печени и содержание белка, активность ферментов ЛДГ, СДГ, Гл-6-ФДГ, МДГ, СуДГ и содержание метаболитов (ПВК и МК) и АТФ углеводного обмена у животных, получавших в разное время кариесогенную диету в комплексе с разным соотношением сахароспиртов в разные сезоны года (осень, зима, весна, лето).

  2. Выявлена зависимость между пищевыми рационами, сезонами, возрастом, активностью исследованных ферментов, уровнем метаболитов и влияния различных доз сахарозаменителей (сорбитол, ксилитол) на углеводный обмен у животных, находящихся разное время на диете или после ее отмены.

  3. Изучено влияние сахарозы и сахарозаменителей на остеоиндуктивную активность нижнечелюстной кости белых крыс.

  4. Предложена усовершенствованная концепция противокариозного действия растительного сахарозаменителя – «стевиозид».

  5. Усовершенствован способ получения нового отечественного сахарозаменителя из растения Stevia rebaudiana Bertoni (патент РФ № 211969 от 1998 г.), олжен быть внедрен в практику функционального питания и применятся в конце приема пищи, завершающей приемом сладкого, для профилактики кариеса и улучшения гигиены полости рта.

  6. Разработана технология получения казаминовых кислот – нового стимулятора роста растений (патент РФ № 2111969 от 2000 г.) рекомендована для внедрения в практику.

  7. Разработанная рецептура профилактического зубного эликсира для полости рта (патент РФ № 2264499 от 2005 г.), рекомендована для внедрения в практику в целях повышения эффективной профилактики кариеса зубов и пародонта.

  8. Разработанная рецептура жевательной резинки «Сила и блеск» для профилактики нарушений кислотно-щелочного равновесия (КЩР) после приема легкоусвояемых углеводов для взрослых и детей.

  9. Рекомендован способ выделения сахарозаменителей для опытно-промышленного производства. Патент РФ № 211069 от 1998г.

10. Основываясь на полученных фактах у крыс и в эксперименте, выявленные изменения ферментов слюны у добровольцев под действием сахарозаменителей расширяют и углубляют представления о патогенезе кариеса, о значении различных доз сахарозы и сахарозаменителей, а также о механизмах влияния высокосахарозной пищи на животных и человека.

Положения, выносимые на защиту

  1. Взаимосвязь между состоянием организма крыс и питанием с различными квотами сахарозы и сахарозаменителей (от 10 до 54%) от объема суточного рациона используемых диет в эксперименте в хронобиологическом аспекте, а также в течение 3-х месяцев и через 3 месяца после отмены диеты и перевода крыс на обычный рацион вивария.

  2. Адаптивные и индуктивные механизмы метаболизма исследуемых ферментов и метаболитов углеводного обмена – ЛДГ, СДГ, Гл-6-ФДГ, МДГ, СуДГ и содержание АТФ, ПВК, МК в слюне, крови, слизистой оболочки полости рта и печени под влиянием различных доз перечисленных сахарозаменителей у животных, находящихся в обозначенные сроки на диете и после ее отмены.

  3. Факторы риска, оказывающие воздействие на остеиндуктивную активность нижнечелюстной кости белых крыс под влиянием различных доз сахарозы и сахарозаменителей, используемых в эксперименте.

  4. Влияние на гомеорезис слюны сахарозы и сахарозаменителей у людей в смешанной слюне.

  5. Новая технология выделения дитерпеновых гликозидов из растительного сырья.

  6. Новая технология выделения казаминовых кислот.

  7. Рецептура нового эффективного зубного эликсира для профилактики кариеса зубов и других стоматологических заболеваний.

Внедрение результатов исследования

  1. Материалы диссертации используются на кафедрах терапевтической стоматологии и пародонтологии ТГМА, патофизиологии, биохимии МГМСУ при чтении лекций по биохимии студентам биологического факультета, а также при переподготовке специалистов высшей квалификации и слушателям факультета повышения квалификации для преподавателей стоматологических факультетов Российской Федерации.

2. Издано в соавторстве учебное пособие для студентов медицинских ВУЗов – «Основы стоматологической биохимии» - М.,2000. Выпущены методические пособия «Рекомендации по использованию казаминовых кислот - нового ростстимулятора» (Тверь, 2009,). «Краткое руководство по уходу за не традиционным растением Стевия» (Тверь, 1998).

3. Проводится работа по организации производства по выпуску экстракта сахарозаменителей из Стевии и профилактического зубного эликсира для полости рта по нашему патенту и ростстимулятора – казаминовые кислоты.



Связь исследований с научной программой

Запланированные исследования выполнены по научной программе, утвержденной 19 мая 1996 г. Ученым Советом Московского медико-стоматологического института и пере- утвержденной 29 мая 2006 года, ныне ГОУ ВПО Московского государственного медико-стоматологического университета Росздравсоцразвития.



Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: Международном конгрессе по клинической энзимологии (Кембридж, Великобритания, 1996); Международной конференции «Пищевые добавки-96» (Москва, 1996).; XVII Международном конгрессе по клинической химии и лабораторной диагностике (Флоренция, Италия, 1999); XVI Международной конференции по проблемам оральной биологии (Шантелли, США, 2000), 2-ой Международной научно-практической конференции «Земледельческая механика в растениеводстве» (17-18 декабря 2003 г.).- М.: ВИМ, 2003. Всесоюзная конференция «Здоровье, патология населения России» 2003, М. На 2-ом конгрессе нанотехнологий, Москва, 2009; Международной научно-практической конференции 2-4 июня 2009 года, Тверь; ХV Международный конгресс челюстно-лицевой стоматологии (17-19 мая 2010 г.) Санкт-Петербург, 2010.

Официальная апробация результатов исследования проведена на совместном заседании сотрудников кафедры пародонтологии, терапевтической стоматологии, детской стоматологии стоматологического факультета ГОУ ВПО Тверской государственной медицинской академии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию *22* июня 2010 г., рекомендована к защите.



Публикации

По результатам исследований опубликована 41 работа, в том числе в изданиях, рекомендованных ВАК – 10, за рубежом – 4, изданы монография, учебное пособие для студентов медицинских ВУЗов, выпущены два методических пособия. Получено 3 патента РФ и одно свидетельство на изобретение.



Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 380 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, изложения полученных результатов, обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций, приложения, списка литературы. Последний содержит 697 источников, из них отечественных – 244, иностранных – 450. Работа иллюстрирована 43 рисунками, содержит 60 таблиц.



ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Экспериментальные исследования на животных

Материалы и методы исследования. Для достижения поставленной цели опыты проводили на 796 белых крысах, разделенных на группы в зависимости от содержания углеводного компонента пищи в диете сорбитола, сахарозы, ксилитола или их смеси, вводимых с пищей в течение одного месяца, 3 – х месяцев или через 3 месяца после их отмены: I) обычная пища вивария (контроль), 2) 54% сорбитола, 3) 54% сахарозы, 4) 27% сорбитола + 27% сахарозы, 5) 54% ксилитола, 6) 27% ксилитола+27% сахарозы, 7) 10% сорбитола + 44% сахарозы, 8) 10% ксилитола + 44% сахарозы.

В пище всех опытных групп от 2-й до 8-й содержалось:18,5% казеина, 18,5% пшеничного хлеба и 2% солевой смеси с поливитаминным комплексом. Объектом исследования служили кровь (или сыворотка), печень, слизистая оболочка полости рта (ПР), слюна, твердые ткани пародонта нижней челюсти.

Кровь получали путем пункции бедренной вены, сыворотку получали центрифугированием после оседания форменных элементов и коагуляции, смешанную слюну получали накануне эксперимента путем стимулирования секреции пилокарпином по В.К. Леонтьеву и Ю. А. Петровичу (1976).

После взятия крови крыс декапитировали. Выделяли печень и слизистую оболочку десны, которые гомогенизировались на холоде в 0,25 М растворе сахарозы. СДГ определяли по Gerlach (1957), Гл-6-ФДГ – по Kornberg, Horrecker (1970), ЛДГ – по Wroblewsky, LaDue (1956), СуДГ – по Ещенко и Вольскому (1982), МДГ – по Bеrgmeyer, Bernt (1974). Концентрацию лактата определяли по Hochorst (1974) в модификации. Активность гистидазы и уроканиазы – по Tabor, Mehler (1965) в модификации В.А. Буробина (1967). Для определения ПВК и АТФ гомогенизацию тканей осуществляли в 0,6 н растворе хлорной кислоты (1:4), отделяли центрифугированием, а в супернантанте определяли содержание ПВК по Czok, Lamprecht (1970) в модификации и АТФ по методу Adam (1962). Определение белка в сыворотке крови в гомогенатах проводили по Lowry и др. (1951).

Исследование остеоиндуктивной активности проводили по Urist (1984).

После забоя животных выделяли фрагменты кортикальной пластины нижнечелюстной кости с обеих сторон в области зубного ряда, включая аль­веолярный отросток. Очищали от мягких тканей, отмывали от крови в 0,9% растворе NаС1 и деминерализацию провели в 0,5 н растворе НС1 (0,25 мл на I мг массы кости) 24 часа при 4°С. Деминерализованный матрикс отмывали от НС1 в 0,9% ра­створе NаС1.


Таблица 1


  1   2   3   4


База данных защищена авторским правом ©zubstom.ru 2015
обратиться к администрации

    Главная страница